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1.
本研究旨在探明鸡恒定链(invariant chain,Ii)与内吞体转运蛋白Rab5a和Rab7b结合的结构域和在细胞内共定位的特征。首先,用PCR和基因突变技术将Ii胞浆区与跨膜区[Ii(Cyt-Tra)]、Ii CLIP (class Ⅱ-associated invariant chain peptide)-三聚体区[Ii(CLIP-TRIM)]和Ii突变体[Ii(M81-87aa)、Ii(M91-99aa)和Ii(M81-99aa)]分别插入pET-32a和pEGFP-C1构建相应的原核和真核重组质粒。其次,将构建的含有绿色荧光蛋白的重组质粒与实验室保存的含有红色荧光Rab5a和Rab7b的重组质粒共转染至人胚胎肾细胞系293 T,观察它们的共定位。将构建的原核重组质粒进行表达和纯化,最后用拉下法和免疫印迹检测Ii与Rab5a和Rab7b的结合域。结果表明,成功构建Ii结构域及Ii突变体的重组质粒。Ii(Cyt-Tra)及Ii突变体均能与Rab5a和Rab7b在细胞内共定位,而Ii(CLIP-TRIM)与空载体却不能。Ii的胞浆区和跨膜区是与Rab5a和Rab7b结合的功能结构域,而不是CLIP与三聚体区。综上所述,鸡Ii与Rab5a和Rab7b共定位和结合的区域是其胞浆区和跨膜区,而不是内质网腔区。这些结果提示Rab分子参与了Ii在胞内细胞器的转运机制,为进一步研究Ii及其载体在细胞内的转运机制和功能提供了新的途径。 相似文献
2.
Protective efficacy of an H5/H7 trivalent inactivated vaccine produced from Re-11, Re-12, and H7-Re2 strains against challenge with different H5 and H7 viruses in chickens 下载免费PDF全文
ZENG Xian-ying CHEN Xiao-han MA Shu-jie WU Jiao-jiao BAO Hong-mei PAN Shu-xin LIU Yan-jing DENG Guo-hua SHI Jian-zhong CHEN Pu-cheng JIANG Yong-ping LI Yan-bing HU Jing-lei LU Tong MAO Sheng-gang GUO Xing-fu LIU Jing-li TIAN Guo-bin CHEN Hua-lan 《农业科学学报》2020,19(9):2294-2300
We developed an H5/H7 trivalent inactivated vaccine by using Re-11, Re-12, and H7-Re2 vaccine seed viruses, which were generated by reverse genetics and derived their HA genes from A/duck/Guizhou/S4184/2017(H5 N6)(DK/GZ/S4184/17)(a clade 2.3.4.4 d virus), A/chicken/Liaoning/SD007/2017(H5 N1)(CK/LN/SD007/17)(a clade 2.3.2.1 d virus), and A/chicken/Guangxi/SD098/2017(H7 N9)(CK/GX/SD098/17), respectively. The protective efficacy of this novel vaccine and that of the recently used H5/H7 bivalent inactivated vaccine against different H5 and H7 N9 viruses was evaluated in chickens. We found that the H5/H7 bivalent vaccine provided solid protection against the H7 N9 virus CK/GX/SD098/17, but only 50–60% protection against different H5 viruses. In contrast, the novel H5/H7 trivalent vaccine provided complete protection against the H5 and H7 viruses tested. Our study underscores the importance of timely updating of vaccines for avian influenza control. 相似文献
3.
将鸡传染性贫血病毒M9905株VP1、VP2基因分别或同时克隆到杆状病毒转移载体pFastBacDUAL中,然后转化到DHIOBAC感受态细胞中与Bacmid杆状病毒穿梭载体进行转座重组,最后将重组子转染Sf9昆虫细胞,得到分别或同时含VP1、VP2基因的重组杆状病毒rBacVP1、rBacVP2及rBacVP1—2。PCR扩增结果证实VP1、VP2基因重组到杆状病毒基因组中;SDS-PAGE电泳分析和间接免疫荧光试验结果表明VP1、VP2基因在重组病毒中得到了表达。 相似文献
4.
5.
AIM: To investigate the effect of cGMP on voltage-gated potassium channel in pulmonary artery smooth muscle cells (PASMCs) from rats exposed to chronic hypoxia. METHODS: (1) Wistar rats were randomly divided into control group (group A) and chronic hypoxia group (group B). Then group B received hypoxia 8 hours per day for 4 consecutive weeks. (2) Single PASMC was obtained via acute enzyme separation method. (3) Conventional whole-cell patch clamp technique was used to record resting membrane potential (Em) and ion currents of voltage-gated potassium channel. The changes of ion currents of voltage-gated potassium channel before and after applying cGMP (1 mmol/L), an agonist of protein kinase G (PKG), and cGMP plus H-8 (1 mmol/L), an inhibitor of PKG were compared between two groups. RESULTS: The Em of group B were significantly lower than that of group A. The ion currents of voltage-gated potassium channel in group A and group B were all significantly inhibited by cGMP [control group: from (118.0±5.0) pA/pF to (89.9±16.5) pA/pF, n=6, P<0.05;chronic hypoxia group: from (81.0±5.0) pA/pF to (56.8±9.1) pA/pF, n=6, P<0.05]and these effects were reversed by H-8 [control group: from (119.2±10.3) pA/pF to (117.8±9.1) pA/pF, n=6, P>0.05;chronic hypoxia group: from (96.8±6.2) pA/pF to (98.0±2.2) pA/pF, n=6, P>0.05]. CONCLUSIONS: The currents of voltage-gated potassium channel was inhibited by chronic hypoxic. The inhibitory effect of cGMP on currents of voltage-gated potassium channel in PASMCs from both normal and chronic hypoxic rats may be probably through the phosphorylation of voltage-gated potassium channel. 相似文献
6.
山楂叶螨抗药性及混配增效作用 总被引:4,自引:2,他引:4
采用载玻片浸渍法测定了山西省忻州、晋中、运城地区山楂叶螨种群对9种杀螨剂的抗药性水平.测定结果表明:忻州地区种群对甲氰菊酯和三氯杀螨醇表现中抗,抗性指数FR分别为17.79和31.93倍,对水胺硫磷和毒死蜱表现低抗,FR值分别为7.74和5.35倍;晋中地区种群对水胺硫磷、甲氰菊酯和三氯杀螨醇均表现中抗,FR值为22.42~33.00倍,而运城地区种群对这3种药剂产生了高抗,FR值分别为135.05、41.53和1714.01倍;运城地区种群对毒死蜱表现中抗,FR值为34.49倍;晋中和运城地区种群对双甲脒表现低抗,FR值分别为5.15和6.89倍;3个种群对阿维菌素、苯丁锡、三唑锡和四螨嗪仍相对敏感.混配增效作用测定结果表明,阿维菌素与甲氰菊酯1:20、1:10、1:5组合以及阿维菌素与三氯杀螨醇1:20、1:10组合均具有明显增效作用,共毒系数为189.63~363.30,其中阿维菌素与甲氰菊酯1:20和1:10组合以及阿维菌素与三氯杀螨醇1:20组合是比较理想的混配组合. 相似文献
8.
9.
浮床种植草坪草对富营养化水体的净化作用研究 总被引:2,自引:0,他引:2
采用浮床种植草坪草技术,研究了高羊茅Festuca arundinacea、匍匐翦股颖Agrostis stolonifera 2种草坪草对富营养化水体的净化能力.试验结果表明,2种草坪草对富营养化水体中的氮(N)、磷(P)、化学需氧量(CODcr)等具有明显的净化效果,尤其对总磷(TP)的净化能力最强,能有效改善富营养化水体的水质;2种草坪草之间,匍匐翦股颖对TP的去除效果显著高于高羊茅对TP的去除效果.研究结果显示浮床种植草坪草技术可能是一条有效的修复富营养化水域的新途径. 相似文献
10.